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Nikon Instruments Europe B.V. | France

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Microscope inversé

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Leader sur le marché, ce microscope inversé est capable de prendre en charge les protocoles d'imagerie les plus avancés dans le domaine des sciences biologiques.

Les scientifiques ont relevé de nombreux défis d'imagerie des cellules vivantes en utilisant des techniques avancées telles que le TIRF, le confocal, le FRET, la photoactivation et la microinjection. Au centre de tout cela se trouve l’Eclipse Ti-E un microscope inversé puissant qui permet d’accéder instantanément à toutes ces techniques ainsi qu’aux optiques révolutionnaires Nikon CFI60. L'Eclipse Ti-E offre des vitesses améliorées, une meilleure flexibilité et une microscopie multimodale efficace, le tout réuni en un microscope entièrement intégré idéal pour l'imagerie de pointe dans le domaine de la recherche et de l’étude des cellules vivantes.

Caractéristiques clés

Imagerie de time-lapsestable avec un système de correction automatique de mise au point

Diagramme du PFS utilisant un objectif à immersion. Un objectif sec est également compatible.

Le Ti-E est équipé du système unique de Perfect Focus System (PFS) qui corrige de façon automatique et en temps réel les dérives de mise au point pendant des périodes prolongées  d'imagerie time-lapse.

Le décalage de mise au point résultant  de la baisse de température provoquée par l’ajout de  réactifs est instantanément corrigé  et de rapides changements au niveau cellulaire peuvent être capturés.

L'intégration du PFS dans  la tourelle porte-objectif permet de gagner de l'espace et d'installer simultanément deux niveaux de composants optiques grâce à la structure en double étage du Ti.


Amélioration des performances sur une plus large gamme de longueur d'onde

En utilisant la longueur d'onde de 870 nm pour la détection de l’interface du couvre-objet, il est possible de travailler  avec des sondes proche infrarouge notamment la Cy5.5. Nikon propose deux modèles de PFS, l'un pour l'imagerie  dans des longueurs d'ondes allant des UV au visible et l'autre pour de l'imagerie multiphotonique. Le modèle multiphoton peut corriger une dérive  de mise au point même lors d’acquisitions avec des longueurs d'onde allant de 880 à 1300 nm.


Maintien de la mise au point à des profondeurs plus importantes

La dérive de mise au point peut à présent et de manière inédite, être corrigée sur un plus grand nombre de plans en z . Il est donc possible de maintenir la mise au point à de très grandes distances de l'objectif et de ce fait, à des profondeurs  plus grandes  dans l’échantillon.

En outre, la plage de correction  de la dérive de mise au point du  PFS a été élargie  fournissant des données plus fiables et plus stables.

Puisque le PFS peut maintenir la mise au point à de plus grandes profondeurs dans l'échantillon, il est possible de capturer des images claires et entières de vaisseaux intersegmentaires à partir du haut de l'aorte dorsale. Dans les trois canaux de couleurs se trouvent trois volumes à différents point de temps (rouge : 0 min, vert : 110 min, bleu : 240 min).

Échantillon : système vasculaire d'un embryon de poisson zèbre (distance de 95-186 µm de la lamelle).
Film offert par : Dr. Robert Fischer, Marine Biological Laboratory 


Compatible avec des boîtes en plastique et des plaques multipuits

En plus des boîtes à fond en verre, des boîtes en plastique peuvent être utilisées avec le PFS.* Le système est particulièrement adapté aux applications de criblage haut débit qui impliquent plusieurs plaques multipuits.

* avec des objectifs spécifiques .


Contrôle et acquisition motorisés à haute vitesse

Acquisitions multipoints de cellules HeLa exprimant de manière transitoire la Venus-tubuline et la mCherry-actine et  marquées avec Hoechst33342 et DiD. (Images en pseudo-couleur) Dr. Kenta Saito, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido University and Dr. Takeharu Nagai, The Institute of Scientific and Industrial Research, Osaka University

Les vitesses d'execution des équipements motorisés tels que la tourelle de filtres de fluorescence et  la platine ont été grandement améliorées ce qui permet une capture d'images à haut débit pendant des expériences  en multidimensions. Des déplacements et des acquisitions plus rapides permettent de réduire les temps d’exposition à la lumière et la photo-toxicité qui en résulte, avec pour résultat des données plus significatives. La centrale de contrôle numérique augmente considérablement la vitesse des accessoires motorisés en réduisant le temps de communication entre les éléments ayant pour effet  une augmentation de la vitesse globale d’utilisation.


Images en contraste de phase haute qualité utilisant des objectifs à ON élevée

Phase Contrast

Le module révolutionnaire de contraste de phase externe permet l'utilisation d'objectifs à O.N. élevée en fond clair pour de l'imagerie à contraste de phase grâce à l’utilisation d’un anneau  de phase externe.  Vu que l'anneau de phase externe ne se trouve pas sur le trajet de la lumière d’épifluorescence, les utilisateurs peuvent capturer des images de fluorescence et  des images à contraste de phase, sans compromettre la transmission en fluorescence.


Intégration avancée des périphériques via le logiciel d'imagerie NIS-Eléments

Systèmes d'imagerie time-lapse Eclipse Ti-E 6D

NIS-Eléments, logiciel d'imagerie complet Nikon permet un contrôle intégré du microscope, des caméras, des composants et des périphériques. L'interface graphique intuitive et le flux de travail efficace facilitent la programmation de séquences d'imagerie automatisées jusqu'à 6 dimensions (X, Y, Z, temps, longueur d'onde, multipoint).


Système d'illumination modulaire TI-LAPP

Le nouveau système Ti-LAPP fournit une large gamme de modules d'illumination qui peuvent être combinés de manière flexible pour créer un système d'imagerie sur mesure pour vos recherches. La modularité du système Ti-LAPP apporte également de la flexibilité lorsque la configuration du système doit être modifiée, une caractéristique essentielle pour les plateformes  et les laboratoires d'imagerie qui ont des besoins changeant en imagerie.


Module DMD

Le module DMD permet une photoactivation et une photoconversion de motifs ou de positions déterminés par l'utilisateur alors que le FRAP conventionnel  ne permet la photoactivation que d'un point unique  positionné manuellement.

Module DMD

Fibroblastes embryonnaires d'une souris co-exprimant la lamine A marquée par la mCherry (rouge) et la  lamine A marquée à la GFP photo-activable qui  a été photo-convertie(vert) dans la région inférieure droite en utilisant  le module DMD et un éclairage LED à  405 nm. Des images  de time-lapse ont été capturées à l'aide d’unéclairage en épi-fluorescence. En photo-activant  une sous-population de protéines de lamine, il est possible d'observer la dynamique et le comportement des échanges entre sous-unités.

Avec l’aimable autorisation des  Dr : Takeshi Shimi et Bob Goldman, Northwestern University Medical School


Module H-TIRF

H-TIRF

Une image de TIRF 3 couleurs très homogène est obtenue , enutilisant un filtre de progression ND, . Une préparation in vitro de microtubules marqués (tétraméthyl-rhodamine et Alexa 647) et de protéines de liaison de la tubuline (Alexa 488) a été imagée en utilisant l'éclairage H-TIRF et le filtre de progression ND., Les angles d'incidence pour plusieurs longueurs d'onde peuvent être ajustés automatiquement.

Avec l’aimable autorisation de Melissa Hendershott et Dr. Ron Vale, University of California, San Francisco

Le module H-TIRF règle automatiquement la mise au point et l'angle d'incidence du laser pour les observations en TIRF en contrôlant  le faisceau de réflexion. Un champ d'illumination TIRF homogène est obtenu avec des filtres de progression de densité neutre (ND).


Combinaison flexible de module

La modularité du système Ti-LAPP et la capacité de configuration flexible offrent des solutions d'imagerie personnalisées pour répondre aux besoins individuels de la recherche. Les modules peuvent être également facilement échangés ou ajoutés pour s'adapter à l'évolution des besoins expérimentaux, une caractéristique essentielle pour les laboratoires avec des orientations de recherche évolutives et les plateformes multi-utilisateurs.. Par exemple, en ajoutant un deuxième module TIRF à une configuration en mono TIRF, les utilisateurs peuvent facilement réaliser des expériences en anisotropie etdes expériences de TIRF multi-angles rapides. L'ajout d'un module de photoactivation /conversion tel que le module DMD ou le module FRAP permet de suivre une sous- population de protéines, mettant en évidence les comportements de protéines qui autrement seraient impossible à visualiser  en imageant  toute la population.

Flexible Module Combination

Capacité de configuration en double étage

Grâce à la structure en strate du Ti deNikon,  des modules peuvent être incorporés  sur deux étages séparésavec plusieurs modules par étage. L'utilisation d'une configuration en  double étage  permet une configuration optimale des filtrespour chaque module d'illumination . Cela permet donc une sélection de filtre optimale et améliore la précision expérimentale tout en maintenant des vitesses d'acquisition des plus élevées.

Two-tiered configuration

Design à ports multiples avec jusqu’à cinq ports d'imagerie

Multiport Design

L'utilisation d'un port arrière optionnel permet une imagerie FRET multilongueur d'ondeavec plusieurscaméras. En outre, en ajoutant une unité de base de tube  comportant un port latéral, jusqu’à cinq ports d'imagerie  sont disponibles* incluant les ports gauche, droit et inférieur.

(*Avec le modèle Ti-E/B comportant un port inférieur)



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