Разрешение | Разрешение

Ключевые слова: флуоресценция, глубина резкости, числовая апертура, конфокальный, деконволюция, отношение сигнал/шум, конденсор, объективы, объективы с масляной иммерсией, объективы с водной иммерсией

Definition:Разрешение – это кратчайшее расстояние между двумя точками, на котором они четко различимы, а не выглядят как единое размытое пятно

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ:

В общем случае разрешающая способность светового микроскопа находится в пределах 0,2 мкм, хотя с помощью флуоресцентных зондов можно идентифицировать более мелкие элементы. Разрешение в микроскопии зависит от качества оптической системы микроскопа и длины волны света, используемого для формирования изображения – более короткие длины волн обеспечивают лучшее разрешение.

Числовая апертура определяет разрешающую способность объектива, но общее разрешение микроскопа зависит также от других факторов, таких как числовая апертура конденсора, правильная юстировка всех компонентов системы и среда, с помощью которой создается изображение (см. объективы с масляной и водной иммерсией). Как правило, разрешение повышается при большем увеличении, но сочетание высокой числовой апертуры и большого увеличения может привести к маленькой глубине резкости и коротким рабочим расстояниям.

Разрешение связано с контрастом и «резкостью» изображения, которые, в свою очередь, ограничены отношением сигнал/шум. Различные математические алгоритмы в виде программного обеспечения для «деконволюции» могут улучшить резкость и упростить интерпретацию изображения.

ПРИМЕНЕНИЕ:

Разрешение определяет то, что пользователь микроскопа может различать, и таким образом является чрезвычайно важным фактором при получении изображений: чем выше разрешение системы, тем больше информации может быть получено из изображения. Уровень требуемого разрешения зависит от конкретной задачи получения изображений, однако большинство микроскопов успешно используются даже не на самом пределе своих разрешающих способностей. Для задач флуоресценции, к которым предъявляются самые жесткие требования, например, при низком освещении и/или работе с толстыми образцами, конфокальная микроскопия может значительно повысить разрешение (по сравнению с широкопольными методами) путем блокировки несфокусированного света, идущего из областей выше и ниже плоскости фокуса. Для получения изображений живых клеток специальное кольцо позволяет корректировать вызванные температурой изменения показателей преломления иммерсионного масла, которые могут вызвать сферические аберрации.

КОНФИГУРАЦИЯ МИКРОСКОПА:

Информация по поводу конфигурации в данном случае неприменима. Самыми важными параметрами для максимизации разрешения микроскопа являются качество оптической системы и правильная установка и юстировка системы.

РЕКОМЕНДУЕМАЯ СИСТЕМА:

Бесконечная скорректированная оптическая система CFI60 от Nikon обеспечивает в своих объективах высокие числовые апертуры и длинные рабочие расстояния, за счет чего для каждой задачи получается оптика с высоким разрешением.

ССЫЛКИ:

Бесконечная оптика CFI60: [microscopyu] 

Числовая апертура, рабочее расстояние и другие свойства объективов: [microscopyu]