Освещение | Освещение

Ключевые слова: затухание флуоресценции в обесцвеченных изображениях (FLIP), восстановление флуоресценции после фотообесцвечивания (FRAP), лазеры, фотообесцвечивание, фототоксичность, конфокальный, диаскопический, эпископический, косое освещение, Микроскопия с контролируемой экспозицией (CLEM), Келер, ртутно-волоконный осветитель

Definition:Освещение – это падающее на образец излучение

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ:

Освещение является, пожалуй, важнейшим фактором при определении общих характеристик оптического микроскопа и должно быть ярким, безбликовым и равномерно рассеянным по всему полю зрения. Существуют различные системы освещения в зависимости от метода получения изображений и конкретной задачи, и они могут быть интегрированы в микроскоп или являться внешними системами. Использование диаскопического или эпископического осветителя, диапазон длин волн, интенсивность и угол освещения влияют на изображения и ту информацию, которая может быть получена от образца. Для работы по специальным методам освещение также может быть модифицировано с помощью дополнительных фильтров, поляризаторов, фазовых колец и т.д.

Большинство микроскопов оснащены встроенной вольфрамово-галоидной лампой, интенсивность которой легко может быть изменена. Ртутные, ксеноновые и циркониевые дуговые лампы также могут быть использованы в качестве источника освещения для специальных видов микроскопии. Например, во флуоресцентной микроскопии источник света должен быть достаточно мощным, чтобы создать необходимый уровень флуоресценции от флуорофоров в образце. Ртутные и ксеноновые дуговые лампы чаще других используются в широкопольной флуоресцентной микроскопии, в то время как лазеры необходимы для конфокальных задач лазерного сканирования. Лазеры обладают тем преимуществом, что их источники освещения обладают маленьким размером, обеспечивая при этом высокую интенсивность излучения, которая может модулироваться с помощью технологий АОМ или AOTF.

При биологических исследованиях желательно иметь возможность точно нацеливать и модулировать интенсивность освещения (особенно в конфокальной флуоресцентной микроскопии), чтобы поддерживать жизнеспособность клетки. Возможность точно нацеливать лазерное излучение принципиально важна для таких методов, как FRAP и FLIP.

ПРИМЕНЕНИЕ:

Правильное освещение требуется для всех задач микроскопии, как в биологии, так и промышленности. Для получения оптимальных изображений все оптические компоненты микроскопа, включая осветитель, должны быть правильно установлены и съюстированы. Кроме того, для эпифлуоресцентной микроскопии требуется стабильная интенсивность освещения без мерцаний.

КОНФИГУРАЦИЯ МИКРОСКОПА:

Nikon поставляет широкий спектр систем освещения, разработанных для специальных методов получения изображений как в биологии, так и в промышленности. Nikon также предлагает различные методы установки и настройки интенсивности освещения, такие как Intensilight (ртутно-волоконный осветитель для эпифлуоресценции) и систему CLEM для получения изображений живых клеток по методу конфокальной флуоресценции.

РЕКОМЕНДУЕМАЯ СИСТЕМА:

Выбор системы освещения зависит от метода получения изображений и от конкретной задачи. Для получения рекомендаций свяжитесь с местным представительством Nikon.

ССЫЛКИ:

Освещение для стереомикроскопии (в отраженном свете) [microscopyu] 

Illumination for stereo microscopy (oblique) [microscopyu] 

Освещение для стереомикроскопии (темнопольное) [microscopyu]