Éclairage | Éclairage
Mots clés: lasers, confocal, FRAP, FLIP, CLEM, Koehler, blanchiment optique, phototoxicité, diascopique, épiscopique, éclairage oblique, excitation, éclairage à fibre au mercure
Définition:L’éclairage est la radiation incidente par rapport à un échantillon observé au microscope
TECHNOLOGIE:
L’éclairage est peut-être le facteur le plus fondamental dans la détermination des performances globales du microscope optique et il doit être lumineux, sans reflet et régulièrement réparti dans le champ d’observation. Il existe divers systèmes d’éclairage disponibles, en fonction de la technique d’imagerie et de l'application, et ils peuvent être intégrés au microscope ou externes à celui-ci. L’utilisation d’un éclairage épiscopique ou diascopique, la plage de longueur d'onde, l'intensité et l'angle d’éclairage affectent tous l’imagerie et les renseignements que l’on peut obtenir de l’échantillon. L'éclairage peut également être modifié pour la mise en œuvre de techniques spécialisées en ajoutant des filtres, des polarisateurs, des modules de phase, etc.
La plupart des microscopes comprennent une ampoule halogène au tungstène intégrée dont il est facile de contrôler l’intensité. Les ampoules à arc au mercure, au xénon et au zirconium constituent également des sources d’éclairage utiles pour certaines formes spécialisées de microscopie. Par exemple, dans l’imagerie en fluorescence, la source de lumière doit être suffisamment puissante pour produire une fluorescence pouvant être observée à partir des fluorophores de l'échantillon. Les ampoules à décharge à arc au mercure et au xénon sont le plus souvent utilisées dans les applications de fluorescence à large champ, tandis que les lasers sont nécessaires pour les applications confocales à balayage laser. Les lasers présentent l’avantage d’être une source de lumière de petites dimensions tout en fournissant une lumière d’intensité élevée, qui peut être modulée en utilisant la technologie AOM ou AOTF.
Dans les environnements biologiques, il est souhaitable de pouvoir cibler et moduler précisément l’intensité de l’éclairage (en particulier dans l’imagerie en fluorescence confocale) afin de préserver la viabilité des cellules. Il est essentiel de pouvoir cibler l’éclairage laser avec une grande précision dans les techniques telles que les techniques FRAP et FLIP.
APPLICATIONS:
Toutes les applications d’imagerie microscopique nécessitent un bon éclairage à la fois dans les domaines biologiques et industriels. Pour une imagerie optimale, tous les composants optiques du microscope, y-compris l’éclairage, doivent être configurés et alignés correctement. De plus, il est indispensable de disposer d’une intensité lumineuse stable et sans aucun scintillement pour l’imagerie en épifluorescence.
CONFIGURATION DU MICROSCOPE:
Nikon propose une large gamme de systèmes d’éclairage conçus pour des techniques d’imagerie spécifiques à la fois dans les environnements biologiques et industriels. Nikon propose également un certain nombre de technologies conçues pour cibler et moduler l’intensité de l’éclairage, notamment le système Intensilight (éclairage à fibre de mercure pour épifluorescence) et le système CLEM pour l’imagerie de cellules vivantes en fluorescence confocale.
SYSTÈME RECOMMANDÉ:
Le système d’éclairage à utiliser dépend de la technique d’imagerie et de l’application. Veuillez consulter votre représentant Nikon local pour obtenir des conseils.
LIENS:
Éclairage pour stéréomicroscopie (reflété) [microscopyu]
Éclairage pour stéréomicroscopie (oblique) [microscopyu]
Éclairage pour stéréomicroscopie (fond noir) [microscopyu]
